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解決方(fang)案

Matrix Builder基質(zhi)噴塗儀介紹

Matrix Builder基質(zhi)噴塗儀,采用(yong)電(dian)噴霧基質(zhi)噴塗技(ji)術(shù)精(jīng)确控製(zhi)基質(zhi)結晶大(da)小(xiǎo),保障了(le)更細膩,更均一(yi)的(de)基質(zhi)噴塗效果。基質(zhi)結晶最小(xiǎo)可(kě)達5 μm。主(zhu)要用(yong)于(yu)MALDI-MSI、DESI-MSI、AFADESI-MSI質(zhi)譜成(cheng)像實驗(yàn)的(de)組織樣品(pin)製(zhi)備(bei)環節(jie),用(yong)于(yu)幫助提高(gao)質(zhi)譜成(cheng)像的(de)信(xin)号強度咊(he)分(fēn)辨率,也(ye)可(kě)用(yong)于(yu)納米材(cai)料噴塗、胰酶噴塗、原位衍生(sheng)化等(deng)實驗(yàn)。目(mu)前(qian)在(zai)脂質(zhi)組學(xué)、蛋白質(zhi)組學(xué)、環境毒理(li)、空間代(dai)謝(xiè)組學(xué)等(deng)領(ling)域(yu)具(ju)有(yǒu)非(fei)常好的(de)使用(yong)場(chang)景。

Matrix Builder基質(zhi)噴塗實驗(yàn)案例展(zhan)示

研究目(mu)的(de)

腦組織微區(qu)具(ju)有(yǒu)特異性。利用(yong)MALDI MSI觀察微區(qu)脂質(zhi)等(deng)代(dai)謝(xiè)小(xiǎo)分(fēn)子(zi)分(fēn)布。

實驗(yàn)方(fang)案設(shè)計(ji)

采用(yong)Matrix Builder基質(zhi)噴塗儀,DHB基質(zhi)(20 mg/mL DHB,溶劑:乙腈/水=8/2),布魯克MALDI-FTICR MSI質(zhi)譜進(jin)行實驗(yàn)。

具(ju)體(ti)參數(shu)如下:

(1)基質(zhi)噴塗儀實驗(yàn)參數(shu)如下:循環次數(shu)爲(wei)8次;泵速(su)爲(wei)0.07 mL/min;掃描間距爲(wei)2 mm;噴嘴溫度爲(wei) 50℃;噴霧壓力(li)爲(wei)0.55 MPa;幹燥時間爲(wei)8 s;噴霧電(dian)壓爲(wei) 0 V;基質(zhi)濃度爲(wei)20mg/mL;噴嘴速(su)度爲(wei) 30 mm/s;掃描方(fang)式(shi)爲(wei)橫向掃描;載波(bo)檯(tai)溫度爲(wei)45℃;保持時間爲(wei)30 s;噴嘴高(gao)度爲(wei)12 mm。

(2)MALDI-FTICR質(zhi)譜分(fēn)析采用(yong)Bruker SolariX質(zhi)譜儀。使用(yong)NaTFA對實驗(yàn)儀器(qi)進(jin)行外部(bu)校标。具(ju)體(ti)的(de)實驗(yàn)參數(shu)如下:Plate offset爲(wei)100 V;Deflector Plate爲(wei)180 V;Laser Shots爲(wei)150 V;Laser Power爲(wei)65%;Frequency爲(wei)150 Hz;Laser Focus爲(wei)medium;步長(zhang)爲(wei)100 µm。數(shu)據處理(li)使用(yong)FlexImaging 5.0軟件(Bruker Daltonics)

實驗(yàn)結果

圖1:質(zhi)譜數(shu)據圖。由圖可(kě)見,大(da)量的(de)脂質(zhi)分(fēn)子(zi)可(kě)以(yi)被檢(jian)測(ce)到(dao)。


圖2:分(fēn)子(zi)成(cheng)像圖,腦微區(qu)分(fēn)子(zi)分(fēn)布有(yǒu)清(qing)晰界限(xian)

實驗(yàn)方(fang)案

采用(yong)Matrix Builder基質(zhi)噴塗儀,DHB基質(zhi),布魯克MALDI-FTICR MSI質(zhi)譜進(jin)行實驗(yàn)。

實驗(yàn)方(fang)案設(shè)計(ji)

采用(yong)Matrix Builder基質(zhi)噴塗儀,DHB基質(zhi)(20 mg/mL DHB,溶劑:乙腈/水=8/2),布魯克MALDI-FTICR MSI質(zhi)譜進(jin)行實驗(yàn)。

具(ju)體(ti)參數(shu)如下:

(1)基質(zhi)噴塗儀實驗(yàn)參數(shu)如下:循環次數(shu)爲(wei)8次;泵速(su)爲(wei)0.07 mL/min;掃描間距爲(wei)2 mm;噴嘴溫度爲(wei) 50℃;噴霧壓力(li)爲(wei)0.55 MPa;幹燥時間爲(wei)8 s;噴霧電(dian)壓爲(wei) 0 V;基質(zhi)濃度爲(wei)20mg/mL;噴嘴速(su)度爲(wei) 30 mm/s;掃描方(fang)式(shi)爲(wei)橫向掃描;載波(bo)檯(tai)溫度爲(wei)45℃;保持時間爲(wei)30 s;噴嘴高(gao)度爲(wei)12 mm。

(2)MALDI-FTICR質(zhi)譜分(fēn)析采用(yong)Bruker SolariX質(zhi)譜儀。使用(yong)NaTFA對實驗(yàn)儀器(qi)進(jin)行外部(bu)校标。具(ju)體(ti)的(de)實驗(yàn)參數(shu)如下:Plate offset爲(wei)100 V;Deflector Plate爲(wei)180 V;Laser Shots爲(wei)150 V;Laser Power爲(wei)65%;Frequency爲(wei)150 Hz;Laser Focus爲(wei)medium;步長(zhang)爲(wei)100 µm。數(shu)據處理(li)使用(yong)FlexImaging 5.0軟件(Bruker Daltonics)

實驗(yàn)結果

圖3 質(zhi)譜數(shu)據圖



圖4 部(bu)分(fēn)脂質(zhi)分(fēn)子(zi)成(cheng)像圖

實驗(yàn)方(fang)案

采用(yong)Matrix Builder基質(zhi)噴塗儀,納米顆粒TiO2基質(zhi)(100nm,10 mg/mL DHB,溶劑:乙腈/水=8/2),布魯克MALDI-FTICR MSI質(zhi)譜進(jin)行實驗(yàn)。

實驗(yàn)方(fang)案設(shè)計(ji)

具(ju)體(ti)參數(shu)如下:

TiO2基質(zhi)2mg/mL溶于(yu)甲醇溶液基質(zhi)噴塗儀實驗(yàn)參數(shu)如下:循環次數(shu)爲(wei)20次;泵速(su)爲(wei)0.08 mL/min;掃描間距爲(wei)2 mm;噴嘴溫度爲(wei) 50℃;噴霧壓力(li)爲(wei)0.6 MPa;幹燥時間爲(wei)8 s;噴霧電(dian)壓爲(wei) 0 V;基質(zhi)濃度爲(wei)2mg/mL;噴嘴速(su)度爲(wei) 30 mm/s;掃描方(fang)式(shi)爲(wei)橫向掃描;載波(bo)檯(tai)溫度爲(wei)45℃;保持時間爲(wei)30 s;噴嘴高(gao)度爲(wei)12 mm。

實驗(yàn)結果

圖5  TiO2對鼠腦解析的(de)總離子(zi)流圖



圖6  TiO2對鼠腦解析的(de)分(fēn)子(zi)成(cheng)像圖

數(shu)據來源:

(1)Anal. Chem. 2015, 87, 12, 5860–5865

(2)維(wei)科(ke)托基質(zhi)噴塗應用(yong)支撐實驗(yàn)室。

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